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標準培養基操作中,主要分為以下幾步順序不要搞錯了

更新時間:2020-12-10瀏覽:1210次
  標準培養基的步驟:
  (一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
  (二)校正pH值:將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1NHCl調節pH值到適宜范圍內。
  (三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。
  (四)分裝:將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
  (五)滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
  標準培養基的營養協調
  微生物細胞組成元素的調查或分析,是設計培養基時的重要參考依據。
  微生物細胞內各種成分間有一較穩定的比例。
  在大多數化能異養菌的培養基中,各營養要素間在量上的比例大體符合以下十倍序列的遞減規律:
  要素:H2O>C源+能源>N源>P、S>K、Mg>生長因子
  含量:(~10-1)(~10-2)(~10-3)(~10-4)(~10-5)(~10-6)
  A.選擇適宜的營養物質,實驗室的常用培養基:
  細菌:牛肉膏蛋白胨培養基(或簡稱普通肉湯培養基);
  放線菌:高氏1號合成培養基培養;
  酵母菌:麥芽汁培養基;
  霉菌:查氏合成培養基;
  實驗室一般培養:普通常用培養基;
  遺傳研究:成分清楚的合成培養基;
  生理、代謝研究:選用相應的培養基配方;
  B.營養物質濃度及配比合適
  營養物質的濃度適宜,營養物質之間的配比適宜;
  高濃度糖類物質、無機鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進微生物的生長,反而起到抑制或殺菌作用。
  培養基中各營養物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。
  真菌需C/N比較高的培養基;(素食)
  細菌(動物病原菌)需C/N比較低的培養基;(葷食)
  
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